平板菌落計數(shù)法的操作步驟分析
更新時間:2023-05-31 文章更新于2023-05-31 點擊次數(shù):3650次
全自動菌落計數(shù)儀是由計數(shù)池深入各系統、計數(shù)筆效率、計數(shù)器及數(shù)碼顯示器等組成多種。本儀器操作方便、計數(shù)準確各方面,可減輕實驗人員的勞動強度,提高工效落地生根,提高工作質量占。該儀器廣泛用于食品、飲料成效與經驗、藥品真諦所在、飲用水、生活污水結構不合理、工業(yè)廢水、臨床標本中細菌數(shù)的檢驗深刻內涵。
平板菌落計數(shù)法是將等測樣品經(jīng)適當稀釋后競爭力,其中的微生物充分分散為單個細胞,取一定量的稀釋液接種到平板上逐步改善,經(jīng)過培養(yǎng)特點,由每個單細胞生長繁殖而形成的肉眼可見的菌落,即一個單菌落應代表原樣品中的一個單細胞落實落細。統(tǒng)計菌落數(shù)意見征詢,根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。平板菌落計數(shù)法的具體操作步驟分析如下:
1深入闡釋、編號
取無菌平皿9套集聚,分別標明為10-4、10-5大大提高、10-6各三套新的動力,另取6支無菌試管分別標記為10-1、10-2調整推進、10-3必然趨勢、10-4、10-5橋梁作用、10-6文化價值。
2、稀釋
用1mL無菌吸管吸取1mL已充分混勻的大腸桿菌菌懸液講故事,地放0.5mL至10-1的試管中單產提升,此即為10倍稀釋,將多余的菌液放回原菌液中系統。
將10-1試管充分振蕩的方法、混勻。另取一支1ml吸管插入10-1試管中來回吹吸菌液三次方法,進一步將菌體分散生產創效、混勻進一步提升。動作不要太猛太快,吸時插入緊密協作,吹時提出提供有力支撐,再用此吸管吸取10-1菌液1mL,地放0.5mL至10-2試管中,此即為100倍稀釋越來越重要,依次類推。
3優化上下、取樣
用三支1ml無菌吸定分別吸取10-4改革創新、10-5、10-6的稀釋菌懸液各1mL發揮重要作用,對號放入編好號的無菌平皿中自行開發,每個平皿放0.2mL。
4取得顯著成效、倒平板
盡快向上述盛有不同稀釋菌液的平皿中倒入融化后冷卻至45度的LB培養(yǎng)基約15-20ml處理方法,置水平位置迅速旋動平皿,使培養(yǎng)基與菌液混合均勻責任。
5服務、培養(yǎng)
倒置于37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時。
6持續向好、計數(shù)
算出同一稀釋度三個平板上的菌落平均數(shù)舉行,并按下列公式進行計算; 每毫升中菌落形成單位(cfu)= 同一稀釋度三次重復的平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×5
平板菌落計數(shù)法是將等測樣品經(jīng)適當稀釋后競爭力,其中的微生物充分分散為單個細胞,取一定量的稀釋液接種到平板上逐步改善,經(jīng)過培養(yǎng)特點,由每個單細胞生長繁殖而形成的肉眼可見的菌落,即一個單菌落應代表原樣品中的一個單細胞落實落細。統(tǒng)計菌落數(shù)意見征詢,根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。平板菌落計數(shù)法的具體操作步驟分析如下:
1深入闡釋、編號
取無菌平皿9套集聚,分別標明為10-4、10-5大大提高、10-6各三套新的動力,另取6支無菌試管分別標記為10-1、10-2調整推進、10-3必然趨勢、10-4、10-5橋梁作用、10-6文化價值。
2、稀釋
用1mL無菌吸管吸取1mL已充分混勻的大腸桿菌菌懸液講故事,地放0.5mL至10-1的試管中單產提升,此即為10倍稀釋,將多余的菌液放回原菌液中系統。
將10-1試管充分振蕩的方法、混勻。另取一支1ml吸管插入10-1試管中來回吹吸菌液三次方法,進一步將菌體分散生產創效、混勻進一步提升。動作不要太猛太快,吸時插入緊密協作,吹時提出提供有力支撐,再用此吸管吸取10-1菌液1mL,地放0.5mL至10-2試管中,此即為100倍稀釋越來越重要,依次類推。
3優化上下、取樣
用三支1ml無菌吸定分別吸取10-4改革創新、10-5、10-6的稀釋菌懸液各1mL發揮重要作用,對號放入編好號的無菌平皿中自行開發,每個平皿放0.2mL。
4取得顯著成效、倒平板
盡快向上述盛有不同稀釋菌液的平皿中倒入融化后冷卻至45度的LB培養(yǎng)基約15-20ml處理方法,置水平位置迅速旋動平皿,使培養(yǎng)基與菌液混合均勻責任。
5服務、培養(yǎng)
倒置于37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時。
6持續向好、計數(shù)
算出同一稀釋度三個平板上的菌落平均數(shù)舉行,并按下列公式進行計算; 每毫升中菌落形成單位(cfu)= 同一稀釋度三次重復的平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×5
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