平板菌落計(jì)數(shù)法步驟

• 更新時(shí)間：2025-03-18
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平板菌落計(jì)數(shù)法是將等測樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋后穩定性，其中的微生物充分分散為單個(gè)細(xì)胞最深厚的底氣，取一定量的稀釋液接種到平板上，經(jīng)過培養(yǎng)資源優勢，由每個(gè)單細(xì)胞生長繁殖而形成的肉眼可見的菌落應用擴展，即一個(gè)單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞。

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平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋之后振奮起來，其中的微生物充分分散成單個(gè)細(xì)胞建立和完善，取一定量的稀釋樣液接種到平板上，經(jīng)過培養(yǎng)增多，由每個(gè)單細(xì)胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落啟用，即一個(gè)單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)估算，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)活動上。但是，由于待測樣品往往不易*分散成單個(gè)細(xì)胞等地，所以產業，長成的一個(gè)單菌落也可來自樣品中的2～3或更多個(gè)細(xì)胞。因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低共享應用。為了清楚地闡述平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果，現(xiàn)在已傾向使用菌落形成單位(colony-forming units尤為突出，cfu)而不以菌落數(shù)來表示樣品的活菌含量情況較常見。
平板菌落計(jì)數(shù)法雖然操作較繁，結(jié)果需要培養(yǎng)一段時(shí)間才能取得標準，而且測定結(jié)果易受多種因素的影響喜愛，但是，由于該計(jì)數(shù)方法的優(yōu)點(diǎn)是可以獲得活菌的信息主要抓手，所以被廣泛用于生物制品檢驗(yàn)(如活菌制劑)保障，以及食品、飲料和水(包括水源水)等的含菌指數(shù)或污染程度的檢測空間載體。


平板菌落計(jì)數(shù)法操作步驟 
1體製、編號 
取無菌平皿9套，分別標(biāo)明為10-4技術先進、10-5示範、10-6各三套，另取6支無菌試管分別標(biāo)記為10-1提高、10-2發展基礎、10-3延伸、10-4、10-5要求、10-6。 
2、稀釋 
用1mL無菌吸管吸取1mL已充分混勻的大腸桿菌菌懸液運行好，精確地放0.5mL至10-1的試管中國際要求，此即為10倍稀釋，將多余的菌液放回原菌液中顯示。 
將10-1試管充分振蕩技術特點、混勻。另取一支1ml吸管插入10-1試管中來回吹吸菌液三次共同努力，進(jìn)一步將菌體分散保持競爭優勢、混勻。動(dòng)作不要太猛太快發展邏輯，吸時(shí)插入方案，吹時(shí)提出，再用此吸管吸取10-1菌液1mL發展機遇，精確地放0.5mL至10-2試管中創新延展，此即為100倍稀釋，依次類推， 
3長效機製、取樣 
用三支1ml無菌吸定分別吸取10-4、10-5聽得進、10-6的稀釋菌懸液各1mL深入，對號放入編好號的無菌平皿中，每個(gè)平皿放0.2mL 
4全技術方案、倒平板 
盡快向上述盛有不同稀釋菌液的平皿中倒入融化后冷卻至45度的LB培養(yǎng)基約15-20ml基本情況，置水平位置迅速旋動(dòng)平皿，使培養(yǎng)基與菌液混合均勻重要的。 
5品質、培養(yǎng) 
倒置于37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)， 
6、計(jì)數(shù) 
算出同一稀釋度三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)能運用，并按下列公式進(jìn)行計(jì)算； 每毫升中菌落形成單位（cfu）= 同一稀釋度三次重復(fù)的平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×5