平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋之后，其中的微生物充分分散成單個(gè)細(xì)胞，取一定量的稀釋樣液接種到平板上迎難而上，經(jīng)過培養(yǎng)有效保障，由每個(gè)單細(xì)胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落，即一個(gè)單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞更高效。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)稍有不慎，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。但是，由于待測樣品往往不易*分散成單個(gè)細(xì)胞的發生，所以，長成的一個(gè)單菌落也可來自樣品中的2～3或更多個(gè)細(xì)胞互動互補。因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低核心技術體系。為了清楚地闡述平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果，現(xiàn)在已傾向使用菌落形成單位(colony-formingunits力度，cfu)而不以絕對菌落數(shù)來表示樣品的活菌含量新產品。

　　平板菌落計(jì)數(shù)法樣品的處理和稀釋

　　1．操作方法：以無菌操作取檢樣25g（或25ml)，放于225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi)持續發展，經(jīng)充分振搖或研磨制成1：10的均勻稀釋液更加廣闊。

　　固體檢樣在加入稀釋液后，最好置滅菌均質(zhì)器中以8000~10000r/min的速度處理1min合作，制成1：10的均勻稀釋液。

　　用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)勇探新路，振搖試管混合均勻長遠所需，制成1：100的稀釋液。

　　另取1ml滅菌吸管擴大，按上項(xiàng)操作順序非常完善，制10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次即換用1支1ml滅菌吸管讓人糾結。

　　2．無菌操作：操作中必須有“無菌操作”的概念不斷完善，所用玻璃器皿必須是*滅菌的，不得殘留有細(xì)菌或抑菌物質(zhì)全面革新。所用剪刀勞動精神、鑷子等器具也必須進(jìn)行消毒處理。樣品如果有包裝方便，應(yīng)用75%乙醇在包裝開口處擦拭后取樣明顯。

　　操作應(yīng)當(dāng)在超凈工作臺(tái)或經(jīng)過消毒處理的無菌室進(jìn)行。瓊脂平板在工作臺(tái)暴露15分鐘，每個(gè)平板不得超過15個(gè)菌落營造一處。

　　3．采樣的代表性：如系固體樣品，取樣時(shí)不應(yīng)集中一點(diǎn)線上線下，宜多采幾個(gè)部位保供。固體樣品必須經(jīng)過均質(zhì)或研磨，液體樣品須經(jīng)過振搖知識和技能，以獲得均勻稀釋液技術創新。